尊龙凯时旗下的SH-SY5Y细胞是一种广泛应用于神经生物学研究的人神经母细胞瘤细胞系,适合用于神经分化、神经退行性疾病模型以及药物毒性测试等多种实验。以下是SH-SY5Y细胞培养的要点和注意事项。
一、SH-SY5Y细胞培养的注意事项
1. 培养基与条件
基础培养基:对于SH-SY5Y细胞,常采用DMEM或RPMI-1640,并补充10-15%的胎牛血清(FBS)和1%的双抗。
培养条件:细胞培养需在37℃、5% CO₂ 的条件下进行,确保湿度处于饱和状态。
换液频率:每2-3天更换一次培养基,以避免细胞过度消耗营养。
2. 细胞传代
消化时间:使用0.25%胰酶(含EDTA)消化1-3分钟,避免细胞被过度损伤。
传代比例:通常保持在1:3至1:6,具体比例可根据细胞密度进行调节(当细胞融合度达到80-90%时进行传代)。
轻柔操作:SH-SY5Y细胞贴壁性较松散,在进行吹打时需要注意轻柔,以免造成机械损伤。
3. 细胞状态监测
形态观察:健康的SH-SY5Y细胞呈现梭形或三角形,并聚集成簇生长。若发现细胞变得圆形、脱落或出现碎片增多,往往表明细胞状态不佳或已被污染。
污染防控:严格执行无菌操作,定期检测以防支原体污染。
4. 冻存与复苏
冻存液:可以使用无血清的细胞冻存液(货号:WXQA100)。
复苏:细胞复苏时需快速解冻,离心去除DMSO,并进行高密度接种以提高存活率。
二、常见问题与解决方案
细胞贴壁性差:可以尝试增加培养基中血清的比例(如提高至15% FBS),或使用多聚赖氨酸对培养皿进行包被。
容易自发分化:应避免细胞过度融合(控制在90%以内),并及时进行传代。
尊龙凯时还先后引进了百余种细胞种子,主要来源于ATCC、DSMZ、JCRB、中科院和国家干细胞资源库等。所有人源细胞系均提供STR鉴定报告,而鼠源细胞则提供种属鉴定,并针对特定位点提供准确的STR鉴定。我们的所有细胞都经过批量冻存,严格管理代次,并进行了无菌及无支原体检测,确保质量可靠。